本文刊于：岭南心血管病杂志，，27（01）：1-4
作者：孔祥权，王志梅，高晓飞，葛震
通讯作者：葛震
摘要目的
探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者外周血T淋巴细胞亚群数量和比例变化特征及意义。
方法
入选年1月至年12月南京医院例冠心病患者，其中急性心肌梗死80例、不稳定型心绞痛84例和稳定型心绞痛90例，另外选择同期79例胸痛综合征患者设为对照组。流式细胞分析法检测各组患者总T淋巴细胞（CD3+淋巴细胞）和T淋巴细胞亚群（CD4+和CD8+淋巴细胞）数量。
结果
与对照组患者比较，急性心肌梗死组患者的CD3+（P0.05）和CD8+（P0.01）淋巴细胞数量明显升高，CD4+淋巴细胞数量显著减少（P0.05），CD4+与CD8+淋巴细胞比值（CD4+/CD8+）明显下降（P0.01），差异均有统计学意义；不稳定性心绞痛组患者的CD3+和CD4+淋巴细胞数量显著增加（P0.05），CD4+/CD8+明显升高（P0.05），差异有统计学意义；稳定性心绞痛组T淋巴细胞数量及比值未见明显差异（P0.05）。
结论
在冠心病的发生和发展过程中伴随着T淋巴细胞亚群水平变化，这些T淋巴细胞亚群水平变化可能与不稳定的冠状动脉粥样斑块形成有关。
冠状动脉（冠脉）粥样硬化性心脏病（冠心病）的发生和发展与特定的免疫反应有关，主要表现在大量单核细胞来源的巨噬细胞和T淋巴细胞浸润，以及炎症因子被激活后产生的炎性反应。在斑块进展和破裂处，发现大量被激活的炎症信号通路和特定的淋巴细胞亚群[1]。但是冠心病的免疫变化特征在一些报道中并没有完全阐明，甚至出现矛盾的结果。在急性冠脉综合征患者中，检测到激活的T淋巴细胞比例明显升高，说明T淋巴细胞在罪犯病变局部被激活[2]。一些在心肌梗死患者中的研究发现，CD4+淋巴细胞比例明显升高，CD4+与CD8+淋巴细胞的比值（CD4+/CD8+）显著下降[3]。而Tsuchihashi等[4]的研究结果却提示急性心肌梗死（acutemyocardialinfarction,AMI）患者CD8+淋巴细胞比例显著下降，CD4+/CD8+明显升高。在人粥样硬化斑块中，有三分之一的T细胞携带CD8分子标志，这些CD8+淋巴细胞能识别并结合到携带HLA分子的邻近细胞，活化的CD8+淋巴通过细胞与细胞接触方式将邻近细胞杀死，并促进动脉粥样硬化斑块生长[5]。虽然T淋巴细胞明确参与了冠脉粥样斑块的进展和不稳定斑块的形成，但冠心病和淋巴细胞分群变化的具体关系尚不十分明确。本研究旨在阐明不同类型冠心病患者淋巴细胞的分群变化及意义。
1资料和方法
1.1一般资料
入选年1月1日至年12月12日在南京医院住院的患者例，其中AMI组80例、不稳定型心绞痛（unstableangina,UA）组84例，稳定型心绞痛（stableangina,SA）组90例，另79例胸痛综合征患者设为对照组。心肌梗死的诊断符合急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南和美国心脏协会（AHA）非ST段抬高型急性冠脉综合征患者管理指南。胸痛综合征定义为胸痛但客观检查如心电图、心肌酶学和冠脉造影等无心肌缺血证据。排除标准：糖尿病、严重的肝功能衰竭、肾功能衰竭、恶性肿瘤、急性感染、自身免疫性疾病、激素替代治疗以及既往已确诊冠心病并接受规范治疗患者。
1.2流式细胞仪检测方法
设实验管和对照管,首先，实验管和对照管分别加新鲜全血μL,然后实验管加入20μLCD3-PerCP单抗，CD4-PE单抗和CD8-FITC单抗；对照管加入同型对照抗体20μL（CD3-PerCPmAb,PE-CD4mAb和FITC-CD8mAb），混匀，室温避光孵育30min。红细胞裂解液裂解红细胞,离心5min，弃上清，用磷酸盐缓冲液洗涤、离心弃上清后，加用0.5mL1%多聚甲醛固定，用流式细胞仪进行检测。
1.3统计学分析
采用SPSS19.0统计软件进行数据分析。连续变量资料以（）表示，组间比较采用Student-t检验。分类资料采用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验。以P0.05（双侧）表示差异有统计学意义。
2结果
2.1各组患者的基线资料比较
各组患者年龄、性别、吸烟率、原发性高血压（高血压）、血脂浓度[三酰甘油（triacylglycerol,TG）和低密度脂蛋白胆固醇（low-densitylipoprotein-cholesterol,LDL-C）]等比较，差异均无统计学意义（P0.05），见表1和表2。
2.2各组患者T淋巴细胞亚群数量和比例比较
与对照组患者相比，AMI组患者的CD3+和CD8+淋巴细胞数量明显升高，CD4+淋巴细胞数量显著减少，CD4+与CD8+淋巴细胞比值（CD4+/CD8+）明显下降，差异有统计学意义（P0.05）；UA组患者的CD3+和CD4+淋巴细胞数量显著增加，CD4+/CD8+明显升高，差异有统计学意义（P0.05）；SA组CD3+、CD4+与CD8+淋巴细胞数量及比值未见明显差异，差异无统计学意义（P0.05），见图1。
3结论
以往对冠心病患者T淋巴细胞亚型的分群变化研究多集中在AMI患者，本研究不仅对AMI患者T淋巴细胞亚型的分群变化做了进一步阐述，也对UA、SA患者T淋巴细胞亚型的分群变化做了评估，发现不同类型冠心病中T淋巴细胞亚型发生了不同的分群变化。
高血脂诱发的细胞免疫反应主要表现为CD8+淋巴细胞的激活，在斑块进展过程中，包括CD8+淋巴细胞在内的大量白细胞聚集在斑块内，这些淋巴细胞参与了疾病的进展和不稳定斑块形成，并导致斑块破裂和斑块侵蚀，引发心血管事件[6]。在有症状的颈动脉粥样斑块中也发现CD8+淋巴细胞数量明显增加[7]。本研究中，CD8+淋巴细胞数量在AMI患者中明显升高，说明CD8+淋巴细胞数量的急剧增加对急性心血管事件的发生具有重要意义。
在本研究中，UA患者CD8+淋巴细胞数量变化虽然不明显，但CD4+淋巴细胞数量以及CD4+/CD8+均明显增加。CD4+和CD8+淋巴细胞都存在于人的粥样硬化斑块中，但在载脂蛋白E-/-和低密度脂蛋白受体-/-小鼠粥样硬化斑块中，CD4+淋巴细胞数量占有绝对优势，这可能与粥样硬化斑块对CD4+淋巴细胞有很高的渗透性有关[8]。将CD4+淋巴细胞过继给免疫缺陷小鼠能加速动脉粥样硬化斑块进展，说明CD4+淋巴细胞在动脉粥样硬化的病理进程中扮演着重要角色[9]。这些结论都提示细胞免疫参与了动脉粥样硬化的发生和发展。
虽然本研究UA患者T淋巴细胞亚群与对照组比较，差异无统计学意义（P0.05），但并不意味着T淋巴细胞没有参与稳定性斑块的形成。研究发现机体在应激条件下，CD8+淋巴细胞被激活，并分化为效应杀伤T细胞，诱导细胞凋亡或杀伤靶细胞，导致动脉内皮损伤[10]。CD4+淋巴细胞被活化后通过与巨噬细胞等的相互作用，参与了氧化型低密度脂蛋白的形成。因此，T淋巴细胞各亚群功能的变化是稳定性斑块形成的重要病理基础。
总之，本研究进一步揭示了淋巴细胞在不同类型冠心病中的分群变化特征，提示淋巴细胞亚群可作为冠心病的危险分层和高危患者的筛选。
参考文献（略）
敬请